酪氨酸酶抑制率，计算公式见2-2：
式（2-2）中：A、B、C、D分别为A、B、C、D四组反应管反应结束后在475nm处的吸光值。
2.3.2 DPPH自由基清除试验
DPPH是一种很稳定的“氮中心”的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用，具有较强的稳定性，具有典型的紫色，当它与提供1个电子的自由基清除剂作用时，生成的产物无色，使溶液的典型紫色变浅，其褪色程度与配对电子数成化学计量关系[9-10]。通过DPPH自由基的清除能力反映了物质的抗氧化活性，清除率越大表明抗氧化活性越强。
通过构建DPPH自由基清除试验体系，评估苦参提取物对DPPH自由基的清除能力，试验反应体系如表2所示。
表2 DPPH自由基清除试验反应体系
| 试管编号 | 无水乙醇 （mL） | 0.2mmol·L-1 DPPH溶液（mL） | 待测样品 （mL） |
| A | 0 | 1.50 | 1.50 |
| B | 1.50 | 1.50 | 0 |
| C | 1.50 | 0 | 1.50 |
按照表2的顺序，加样结束后，25℃水浴下恒温反应20min，在517nm处测各管吸光值。清除率计算公式为：
式（2-3）中，A、B、C分别为A、B、C三组反应管反应结束后在517nm处的吸光值。
3 结果与分析
3.1活性物测定结果
检测结果：50%丁二醇水溶液提取的苦参提取物样液中，黄酮含量为17.2mg/g，苦参碱及氧化苦参碱含量分别为0.834mg/g、13.6mg/g。说明苦参富含多种活性成分，为其在化妆品护肤功效应用提供一定的物质基础。
3.2酪氨酸酶抑制能力
由图1可知，苦参提取物可以有效抑制酪氨酸酶活性，随着苦参提取物受试浓度的增加，酪氨酸酶活性抑制率逐渐增加，其抑制率与受试浓度呈现出良好的量效关系；苦参提取物对酪氨酸酶活性抑制率IC50值约为0.31%（质量分数），表明苦参提取物具有潜在的美白功效。
图1 酪氨酸酶抑制能力
3.3 DPPH清除自由基能力
不同浓度的苦参提取物对DPPH自由基的清除率结果，见图2。由图2可知，苦参提取物具有优异的清除DPPH自由基活性，且随着受试浓度的增加，清除率逐渐增大，且呈现出良好的量效关系。苦参提取物对DPPH自由基清除率IC50值为0.19%（质量分数），说明了苦参提取物具有良好的抗氧化功效。
图2 DPPH自由基清除能力
4 结论
苦参根提取物富含黄酮、苦参碱及氧化苦参碱等生物活性成分，为其护肤应用提供了物质基础。通过抑制酪氨酸酶试验及DPPH自由基清除率试验，证实了苦参提取物对酪氨酸酶活性具有良好的抑制作用，在清除DPPH自由基活性方面作用显著，且随着苦参提取物受试浓度的增加，呈现良好的量效关系。因此，苦参提取物应用于护肤中，预期具有良好的美白、抗氧化功效。
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