酪氨酸酶抑制率,计算公式见2-2:
式(2-2)中:A、B、C、D分别为A、B、C、D四组反应管反应结束后在475nm处的吸光值。
2.3.2 DPPH自由基清除试验
DPPH是一种很稳定的“氮中心”的自由基,它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍,使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用,具有较强的稳定性,具有典型的紫色,当它与提供1个电子的自由基清除剂作用时,生成的产物无色,使溶液的典型紫色变浅,其褪色程度与配对电子数成化学计量关系[9-10]。通过DPPH自由基的清除能力反映了物质的抗氧化活性,清除率越大表明抗氧化活性越强。
通过构建DPPH自由基清除试验体系,评估苦参提取物对DPPH自由基的清除能力,试验反应体系如表2所示。
表2 DPPH自由基清除试验反应体系
试管编号 | 无水乙醇 (mL) | 0.2mmol·L-1 DPPH溶液(mL) | 待测样品 (mL) |
A | 0 | 1.50 | 1.50 |
B | 1.50 | 1.50 | 0 |
C | 1.50 | 0 | 1.50 |